天天快资讯:双缩脲试剂检测蛋白质原理 双缩脲试剂检测中蛋白质的评价
关于双缩脲试剂检测蛋白质原理 的知识大家了解吗?以下就是小编整理的关于双缩脲试剂检测蛋白质原理 的介绍,希望可以给到大家一些参考,一起来了解下吧!
今天给大家分享几个关于双缩脲试剂检测蛋白质原理的问题。以下是边肖对这个问题的总结。让我们来看看。
一、双缩脲试剂检测蛋白质的原理是什么?
(资料图片)
由于蛋白质分子中含有许多与缩二脲结构相似的肽键,缩二脲试剂在碱性溶液中能与蛋白质反应生成紫色络合物。因此,蛋白质检测的实验原理是缩二脲试剂与紫色的蛋白质发生反应。
用于检测缩二脲,蛋白质分子中含有许多与缩二脲结构相似的肽键,因此在碱性溶液中也能与铜离子发生缩二脲试验。当底物含有肽键时,试液中的铜与多肽配位,络合物呈紫色。浓度可通过比色法分析,紫外-可见光谱中的波长为540nm。识别反应的灵敏度为5-160毫克/毫升。
双缩脲试剂检测中蛋白质的评价:
优点:双缩脲法测定蛋白质的范围为1~10mg蛋白质,操作简单快捷。既适合手工操作,也适合自动分析,重复性好,线性关系好,双缩脲试剂可长期保存(如果保存瓶中出现黑色沉淀,需重新配制)。
缺点:灵敏度差,测量范围窄,样品要求大,不同蛋白质产生的颜色深浅相似,所以常用于需要快速,但不需要很精确的蛋白质测量。干扰物质包括本质上是氨基酸或肽的缓冲液,例如TrIs缓冲液。因为它们产生阳性显色反应,铜离子容易被还原,有时会出现红色沉淀。
二。双缩脲试剂鉴别蛋白质的原理?!
蛋白质的肽键类似缩二脲,在碱性环境下(缩二脲试剂)能与铜离子形成紫色络合物。稀释的氢氧化铜溶液(灼烧试剂)具有弱氧化性,能与还原糖中的醛基反应生成砖红色氧化亚铜沉淀。
缩二脲试剂是一种用于鉴定蛋白质的分析化学试剂。它是一种碱性含铜试液,呈蓝色,由0.1克/毫升氢氧化钠或氢氧化钾、0.01克/毫升 *** 铜和酒石酸钾钠组成。
扩展数据
双缩脲试验主要涉及肽键,所以受蛋白质特异性影响较小。而且所用试剂廉价易得,操作简单。可测范围为1-10 mg蛋白质,适用于精度要求不高的蛋白质含量的测量。可测定的蛋白质含量必须在0.5mg左右以上,浓度可用比色法分析,紫外-可见光谱中的波长为540nm。
双缩脲法的缺点是准确度低,样本量大。干扰该测定的物质包括缓冲液,其本质上是氨基酸或肽,例如TrIs缓冲液。因为它们产生阳性显色反应,铜离子容易被还原,有时会出现红色沉淀。
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